Die Nikolai Kirche ist ein evangelisch–lutherischer Kirchenbau in der Stadt Siegen in Nordrhein–Westfalen. Sie ist ein historisches Wahrzeichen der Stadt und liegt am südöstlichen Rand des Siegerländer Stadtzentrums.
Die Kirche stammt aus dem 14. Jahrhundert und wurde im Zuge der Reformation im Jahr 1555 eingeweiht. Der barocke Altar und die Orgel aus dem 18. Jahrhundert sind weltweit bekannt. Einigeursprünglich sehenswerte Fresken, die hinter dem Altar zu finden waren, wurden leider im Laufe der Jahre zerstört.
Die Kirche ist ein beliebtes Ausflugsziel und bietet Führungen und Konzerte. Das Gebäude befindet sich in der nördlichen Stadtmauer an der Ecke Kölner Straße / Nikolaiplatz in Siegen.